3.2 E. coli[pET32-JAZ1]诱导表达

    将构建的pET32-JAZ1质粒转化表达菌BL21(DE3)中，加入IPTG诱导表达，所得菌体经离心煮沸后进行SDS-PAGE蛋白电泳分析，在45 kDa处出现目的蛋白条带，丹参JAZ1基因的cDNA由642个碱基组成，编码24 kDa蛋白，原核表达载体pET32a上的His-Tag标签大小为21 kDa，所以重组表达载体编码蛋白大约为45 kDa；而阴性对照E. coli[pET32a]诱导表达后在45 kDa处没有条带出现(图2)，在21 kDa处出现的条带为His-Tag标签。表明含有SmJAZ基因的重组质粒，在大肠杆菌中成功表达。

    图2 pET32JAZ1原核表达

    Fig.2 Analysis of the pET32-JAZ fusion protein expression by SDS-PAGE

    3.3 E. coli[pET32-JAZ1]表达条件的优化

    3.3.1 诱导时间对pET32-JAZ1蛋白表达的影响 保持诱导温度30 ℃ ......